簡介
二硫蘇糖醇是一種常用還原劑,又叫二巰基蘇糖醇(簡稱DTT),具有很強的還原性,其還原性很大程度上是由于其氧化狀態(tài)六元環(huán)(含二硫鍵)的構象穩(wěn)定性。還原力受pH值Chemicalbook的影響,只在pH值大于7的情況下能夠發(fā)揮還原作用。這是因為只有脫去質子的硫醇鹽負離子(-S–)才具有反應活性,硫醇(-SH)則沒有;而巰基的pKa一般為~8.3。
化學性質
二硫蘇糖醇對一個典型的二硫鍵的還原是由兩步連續(xù)的巰基-二硫鍵交換反應所組成:其中,第一步反應所形成的中間態(tài)很不穩(wěn)定,因為DTT上的第二個巰基趨向于與被氧化的硫原子連接,使中間態(tài)很快被轉化為DTT的環(huán)狀氧化結構,從而完成對二硫鍵的還原。由于容易被空氣氧化,因此二硫蘇糖醇(DTT)的穩(wěn)ChemChemicalbookicalbook定性較差;但冷凍保存或在惰性氣體中處理能夠延長它的使用壽命。由于質子化的硫的親核性較低,隨著pH值的降低,DTT的有效還原性也隨之降低;而Tris(2-carboxyethyl)phosphineHCl(TCEP鹽酸鹽)可以作為低pH值條件下DTT的替代品,而且也比DTT更為穩(wěn)定。
作用